猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

• 作者: 安利民 张军 温书香 潘燕燕 葛位西 赵协
• 来源期刊: 江苏农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪伪狂犬病毒 荧光定量PCR技术 灵敏度 标准曲线
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 50-53
• 页数: 4页
• 分类号: S858.285.3
• 字数: 3199字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15889/j.issn.1002-1302.2019.07.013

摘要

为建立一种快速、特异、鉴别诊断猪伪狂犬病毒野毒感染与疫苗免疫株,参考GenBank上公布的猪伪狂犬病毒gE基因序列设计了1对引物,以猪伪狂犬病毒核酸作为模板,PCR方法将扩增得到的核酸序列克隆到PEGM-18T载体上,将克隆载体转化到DH5α感受态细胞中,测序鉴定阳性重组质粒作为标准品建立猪伪狂犬病毒荧光定量PCR检测方法.结果 表明,本研究所建立的猪伪狂犬病毒荧光定量PCR方法检测灵敏度可达10拷贝,与蓝耳病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和可重复性.此外,对33份疑似猪伪狂犬病料也作了检测,结果表明,2份病料均为阳性.本研究建立的猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好、不发生交叉反应等优点,可用于日常猪伪狂犬病毒野毒感染与疫苗免疫株的鉴别诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘燕燕		8	8	2.0	2.0
2	张军		5	8	2.0	2.0
3	安利民		5	5	2.0	2.0
4	葛位西		8	8	2.0	2.0
5	温书香		1	2	1.0	1.0
6	赵协		2	4	2.0	2.0