AEP环化酶的高效原核诱导表达与活性检测体系的建立

• 作者: 何华华 彭文舫 胡晓韵
• 来源期刊: 湖北大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: AEP环化酶 环化肽 大肠杆菌 融合表达
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 基因表达与酶活性研究专栏
• 页码范围: 20-26
• 页数: 7页
• 分类号: Q786
• 字数: 5352字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2375.2020.01.003

摘要

天冬酰胺内切酶(AEPs)可催化短肽形成结构异常稳定的环肽,其具有药物设计框架的应用前景.将来源于白花蛇舌草(Oldenlandia affinis)中AEP(OaAEP1b)环化酶(cyclase)基因采用融合标签表达的策略在大肠杆菌菌株BL21中进行诱导表达,并比较了不同的融合标签麦芽糖结合蛋白( MBP),N-utilization substance A( NusA),小泛素修饰蛋白(SUMO),绿色荧光蛋白(GFP)以及泛素(ubiquitin)对AEP环化酶表达量的影响.结果表明,MBP标签对AEP的表达促进作用最强,达到(3. 6 ± 0. 05) mg/L,是目前文献报道的2倍.体外酶切实验证实该环化酶可对融合表达的底物蛋白MBP-Kalata B1-6?His-GST进行有效切割,但连接反应过程有待验证.本研究对AEP环化酶进行肽工程研究与应用奠定了较好的基础,并提供了一套高效的研究工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡晓韵	湖北大学生命科学学院省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室	2	0	0.0	0.0
2	何华华	湖北大学生命科学学院省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室	2	0	0.0	0.0
3	彭文舫	湖北大学生命科学学院省部共建生物催化与酶工程国家重点实验室	1	0	0.0	0.0