新生隐球菌酵母双杂交cDNA文库的构建及鉴定

• 作者: 刘意抒 廖万清 方伟 王桂祯 赵静宇 顾菊林
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 新生隐球菌 酵母双杂交 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 134-137
• 页数: 4页
• 分类号: R379.5
• 字数: 3020字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建新生隐球菌H99细胞酵母双杂交cDNA文库,为后续深入研究新生隐球菌的蛋白功能以及病原-宿主相互作用机制奠定基础.方法 提取对数生长中期的隐球菌细胞mRNA,以5'端标记有Oligo dT primer为引物反转录,合成双链后连接Adapter.分级纯化后,通过BP重组反应构建入门文库,入门文库扩增后提取质粒,通过LR重组反应转化为表达文库.结果 入门文库总容量为1.13×107 CFU,阳性率为90.63％.表达文库总容量为1.25×107 CFU,阳性率100％.结论 构建的表达文库具有较高的质量,此文库可用于研究新生隐球菌的蛋白互作机制,筛选与宿主蛋白相互作用的隐球菌蛋白,为新生隐球菌的分子致病机制研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾菊林	上海东方肝胆外科医院皮肤科	2	0	0.0	0.0
2	刘意抒	上海东方肝胆外科医院内科教研室	1	0	0.0	0.0
3	王桂祯	上海市第十人民医院急诊科	1	0	0.0	0.0