家蝇三龄幼虫Mdctl基因原核表达及生物信息学分析

• 作者: 修江帆 吴建伟 国果 常振策 李忠旬 贾利娜
• 来源期刊: 贵州医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 家蝇 Mdctl基因 原核表达 蛋白纯化 生物信息学 基因表达
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 专题研究2
• 页码范围: 145-150
• 页数: 6页
• 分类号: R384.2
• 字数: 3824字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19367/j.cnki.1000-2707.2020.02.004

摘要

目的:构建家蝇C型凝集素基因(Mdctl)原核表达体系,对Mdctl基因及编码蛋白进行生物信息学分析.方法:采用生物信息学方法,分析Mdctl基因及编码蛋白;将构建的pET28a(+)/Mdctl重组表达质粒转化至大肠杆菌BL21-DE3中,以异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组蛋白并通过SDS-PAGE对表达产物进行分析;Ni-IDA法纯化重组蛋白,Western-Blot对其鉴定.结果:生物信息学分析显示,Mdctl基因开放阅读框全长333 bp,共编码110个氨基酸,理论分子量为13.13 kDa,等电点为4.49,信号肽位于1～22位氨基酸之间;Mdctl蛋白中存在Clect结构域,属于C型凝集素超家族;Mdctl重组蛋白在大肠杆菌BL21-DE3中主要以包涵体形式表达,重组蛋白的相对分子质量与Mdctl蛋白两端融合6×His标签后的总分子量相一致.结论:成功构建Mdctl原核表达系统,并获得重组蛋白.