黄连碱上调miR-146a-5p后通过PI3K/AKT通路减轻由MPP+诱导的帕金森病细胞模型损伤

• 作者: 李燕 梁会娟 陈红利
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 关键词: 黄连碱 miR-146a-5p PI3K/AKT信号通路 帕金森病 细胞损伤
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2-8
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2020.01.001

摘要

目的 探讨黄连碱对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导的帕金森病(PD)细胞损伤的影响及其机制. 方法 用0.3 mmol/L的Mpp+处理SK-N-SH细胞作为PD细胞模型,记为Mpp+组,以正常培养的细胞作为空白对照组.用浓度分别为10 μmol/L、20 μmol/L、40μmol/L的黄连碱预处理4h后再用0.3 mmol/L的MPp+处理作为不同浓度黄连碱处理组.将miR-con、miR-146a-5p转染至SK-N-SH细胞后再用0.3 mmol/L的Mpp+处理记为MPP++miR-con组、MPP++miR-146a-5p组;将anti-miR-con、anti-miR-146a-5p转染至SK-N-SH细胞后用20 μmol/L的黄连碱预处理4h及0.3 mmol/L的Mpp+处理记为MPP++Cop+anti-miR-con组、MPP++Cop+anti-miR-146a-5p组.四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞存活率;Western blotting实验检测活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)蛋白表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测miR-146a-5p表达水平. 结果 与空白对照组比较,Mpp+处理后SK-N-SH细胞存活率显著降低,活化caspase-3表达水平显著升高,细胞凋亡率显著升高,CyclinD1、miR-146a-5p表达水平显著降低,差异均有统计学意义(P＜0.05).黄连碱处理及miR-146a-5p过表达后Mpp+诱导的SK-N-SH细胞中细胞存活率显著升高,活化caspase-3表达水平显著降低,细胞凋亡率显著降低,CyclinD1、miR-146a-5p表达水平显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).低表达miR-146a-5p逆转了黄连碱对SK-N-SH细胞增殖促进和凋亡抑制的作用.黄连碱处理后MPP+诱导的SK-N-SH细胞中p-AKT、p-PI3K表达水平显著升高,低表达miR-146a-5p逆转了黄连碱对p-AKT、p-PI3K表达水平的促进作用. 结论 黄连碱可促进细胞存活,抑制Mpp+诱导的细胞凋亡,其机制可能与miR-146a-5p及PI3K/AKT信号通路有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁会娟	新乡医学院第三附属医院临床药学室	8	61	4.0	7.0
2	陈红利	新乡市中心医院药学部	4	1	1.0	1.0