肠道病毒71型2A蛋白酶通过切割宿主蛋白泛素特异性蛋白酶4促进病毒的复制

• 作者: 俞蕾 史伟峰 盛成兰 许超
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肠道病毒71型 2A蛋白酶 泛素特异性蛋白酶4 抗病毒免疫
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 286-290
• 页数: 5页
• 分类号: R446|R373.2
• 字数: 4759字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2020.04.13

摘要

目的 探讨肠道病毒71型(EV71) 2A蛋白酶与宿主蛋白泛素特异性蛋白酶4(USP4)在EV71感染中的作用.方法 实时荧光定量PCR检测EV71感染人横纹肌肉瘤细胞(RD)后USP4 mRNA表达水平,western blot检测VP1及USP4蛋白;通过敲减宿主细胞USP4,观察VP1 mRNA的表达和病毒滴度水平;通过过表达2A蛋白酶,研究宿主细胞USP4蛋白的切割原因.结果 荧光定量PCR结果表明,EV71感染8h时USP4 mRNA的表达水平开始降低(0h、8h分别为1.03±0.04和0.83±0.02,t=4.50,P＜0.05);western blot结果表明,EV71感染8h时USP4的蛋白质表达水平降低(0h、8h分别为1.25±0.01和0.51±0.02,t=57.32,P＜0.05)并出现切割条带;敲除宿主细胞USP4 8 h后,与对照组(1.48±0.08)相比,实验组VP1 mRNA表达水平(3.66±0.08)明显升高(t=17.51,P＜0.05);病毒滴度检测结果发现,与对照组病毒滴度[(8.20+0.17)×105 PFU/mL]比较,siRNA1敲除组病毒滴度[(10.55±0.29)×105 PFU/mL]升高,差异有统计学意义(t=6.98,P＜0.05).过表达2A蛋白酶,宿主蛋白USP4出现切割条带.结论 USP4参与抗病毒免疫反应,可能正向调节抗病毒信号通路;EV71可通过2A蛋白酶切割宿主细胞蛋白USP4从而逃逸免疫应答,促进病毒的复制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	史伟峰	苏州大学附属第三医院检验科	49	239	8.0	12.0
2	许超	上海市第十人民医院崇明分院检验科	2	0	0.0	0.0
3	俞蕾	上海市第十人民医院崇明分院检验科	2	0	0.0	0.0
4	盛成兰	上海市第十人民医院崇明分院检验科	2	0	0.0	0.0