牙龈卟啉单胞菌蛋白酶Ltp1的表达、纯化及酶学性质研究

• 作者: 夏荣 孔文文 顾前程
• 来源期刊: 安徽医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 牙龈卟啉单胞菌 Ltp1(PG1641) 蛋白表达纯化 牙周病 酶学研究
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 974-978
• 页数: 5页
• 分类号: R781
• 字数: 4168字
• 语种: 中文
• DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.06.030

摘要

采用重组法构建Ltp1的原核表达载体,并将其转化至E.coli BL21(DE3)中进行异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导过表达,然后用镍柱层析法粗纯化,分子筛细纯化得到目的 蛋白,以SDS-PAGE电泳和Western blot分析表达产物;将目的蛋白和底物对硝基苯磷酸二钠显色反应分析其活性.SDS-PAGE结果显示有与目的蛋白理论相对分子质量一致的表达条带;Western blot分析证实该蛋白带有6个组氨酸(His)标签的目的蛋白,能够催化磷酸单酯的活性;计算出米氏常数(Km)和最大反应速率(Vmax)分别为70.4μmol、51.1μmol/(L·min),pH 5.0～6.0催化活性最高,在37～50℃具有较高活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏荣	安徽医科大学第二附属医院口腔科	40	251	9.0	14.0
2	顾前程	安徽医科大学第二附属医院口腔科	1	0	0.0	0.0
3	孔文文	中国科学技术大学结构与生物化学实验室	1	0	0.0	0.0