超级细菌blaNDM-1和mcr-1基因双重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 冯淑萍 尹彦文 屈素洁 施开创 陆文俊
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: 超级细菌 blaNDM-1基因 mcr-1基因 TaqMan探针 双重荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 23-30
• 页数: 8页
• 分类号: S852.612
• 语种: 中文

摘要

为了建立可同时检测超级细菌blaNDM-1基因和mcr-1基因的快速检测方法,针对blaNDM-1基因和mcr-1基因保守序列设计特异性引物和TaqMan探针,以构建含有blaNDM-1基因和mcr-1基因片段的重组质粒作为阳性标准品,通过优化各种反应条件,建立同时检测blaNDM-1基因和mcr-1基因的双重荧光定量PCR方法.该方法能够特异性扩增blaNDM-1基因和mcr-1基因质粒标准品,而对照标准菌株的检测结果均为阴性.两种质粒标准品的检出下限均为1.63×101拷贝/μL,比常规PCR敏感性高100倍;组内和组间重复试验的变异系数均小于2％.应用所建立的方法对55株鸡源致病性沙门氏菌、10株生鲜畜禽产品源大肠杆菌临床分离株进行检测,未发现携带blaNDM-1基因和mcr-1基因的沙门氏菌分离株,发现2株携带blaNDM-1基因和1株携带mcr-1基因的大肠杆菌分离株.结果 表明,本研究所建立的双重荧光定量PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,为blaNDM-1基因和mcr-1基因的快速检测提供了有效的技术手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	施开创		46	217	7.0	12.0
2	冯淑萍		10	28	4.0	5.0
3	尹彦文		14	36	4.0	5.0
4	屈素洁		28	57	4.0	5.0
5	陆文俊		20	68	5.0	7.0