猪细小病毒NS1蛋白65-133位氨基酸缺失对其核定位的影响

• 作者: 张驰 徐盟龙 王朋涛 袁一心 靳晓慧 魏战勇
• 来源期刊: 河南农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细小病毒 NS1蛋白 核定位
• 年，卷（期）: 2020,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧与兽医科学
• 页码范围: 630-637
• 页数: 8页
• 分类号: S855.3|S828
• 字数: 6068字
• 语种: 中文

摘要

为了探究猪细小病毒NS1蛋白入核机制,通过生物信息学网站预测PPV NS1核定位序列,根据GenBank上传的PPV非结构蛋白NS1的序列设计NS1扩增引物和一系列重叠PCR引物,以河南省动物性食品安全重点实验室保存的猪细小病毒DNA为模板,扩增NS1和缺失突变体基因,构建真核表达重组质粒pCAGGS-HA-NS1、pCAGGS-HA-NS165-133aaDel、pCAGGS-HA-NS1207-267aaDel.将其转染至PPV易感猪源细胞系PK-15细胞,通过免疫荧光和Western-blot鉴定NS1和不同的NS1缺失突变体在细胞内的核定位情况.结果表明,pCAGGS-HA-NS1、pCAGGS-HA-NS165-133aaDel、pCAGGS-HA-NS1207-267aaDel编码蛋白均成功表达.免疫荧光和Western-blot显示NS1和NS1207-267aaDel蛋白定位于细胞核,而NS165-133aaDel蛋白的细胞定位较NS1发生改变,由细胞核定位改变为细胞质定位,说明PPV NS1蛋白65-133位氨基酸缺失能改变其在细胞内的核定位,PPV NS1蛋白核定位序列NLS存在于NS1的65-133aa处.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	魏战勇	河南农业大学牧医工程学院	71	500	12.0	18.0
5	张驰	河南农业大学牧医工程学院	4	3	1.0	1.0
6	徐盟龙	河南农业大学牧医工程学院	1	0	0.0	0.0
7	袁一心	河南农业大学牧医工程学院	2	0	0.0	0.0
8	王朋涛	河南农业大学牧医工程学院	2	2	1.0	1.0
9	靳晓慧		2	2	1.0	1.0