植酸酶YiAPPA在粪肠球菌中的高效组成型表达研究

• 作者: 曾静 杨罡 袁林 郭建军 陈俊 魏国汶
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 植酸酶 粪肠球菌 启动子 组成型表达
• 年，卷（期）: 2020,（9）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 124-130
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 5911字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.09.020

摘要

旨在获得强组成型启动子来实现植酸酶YiAPPA在粪肠球菌EXW27中的高效组成型表达.本研究通过对比分析粪肠球菌中16S rRNA的启动子序列,将启动子中非保守区域替换为随机化序列,获得随机的人工启动子序列.然后利用大肠杆菌一乳酸菌穿梭质粒pSIP409中酶切位点构建人工启动子文库,并结合植酸酶活性的高通量筛选技术,筛选获得启动YiAPPA在粪肠球菌EXW27中高效组成型表达的强组成型启动子,实现YiAPPA在粪肠球菌EXW27中成功表达,并研究重组YiAPPA的酶学性质.结果 表明,在组成型启动子p10的控制下,重组YiAPPA在粪肠球菌EXW27中成功表达,其表达量约占细胞内蛋白总量的15％.重组YiAPPA的最适反应pH为4.5,在piH1.0～10.0的范围内具有优良的pH稳定性,于55℃的绝对酶活高达3900 U/mg.本研究构建了既具有益生特性又具有植酸酶活性的转基因粪肠球菌,为研制新型转基因微生态制剂奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭建军	江西省科学院微生物研究所	51	113	5.0	8.0
2	袁林	江西省科学院微生物研究所	36	59	4.0	5.0
3	曾静	江西省科学院微生物研究所	28	46	3.0	5.0
4	魏国汶	江西省科学院微生物研究所	17	32	3.0	5.0
5	杨罡	江西省科学院微生物研究所	7	17	3.0	4.0
6	陈俊	江西省科学院微生物研究所	5	7	2.0	2.0