牛病毒性腹泻病毒衣壳蛋白原核表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 张忠辉 殷宏 独军政 王建东 田占成 高闪电
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 衣壳蛋白 表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 预防兽医
• 页码范围: 78-82
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文

摘要

试验旨在通过原核表达获得牛病毒性腹泻病毒(BVDV)衣壳蛋白(C),以制备抗C蛋白多克隆抗体.根据BVDV C蛋白的编码序列设计一对特异性引物,利用PCR扩增编码BVDV C蛋白片段,定向插pPET-42a载体中,转化大肠杆菌BL21 Rosetta (DE3) pLysS感受态细胞,筛选重组阳性菌株,IPTG诱导表达,金属离子层析法纯化得到分子质量为45 kDa的重组C蛋白.利用纯化的重组C蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,间接ELISA检测多克隆抗体效价达到1∶25600.经间接免疫荧光证实制备的多克隆抗体可与细胞中的BVDV抗原发生反应,具有良好的反应性.本研究成功制备了BVDV重组C蛋白的兔源多克隆抗体,为BVDV衣壳蛋白功能的研究奠定了基础.