新型冠状病毒N蛋白优势表位区段抗原的克隆表达及其诊断价值初步评价

• 作者: 王坤 张玲 王超男 陈远哲 范占科 李垚 刘念 冯晓燕 付强 张贺秋
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 新型冠状病毒 N蛋白 优势表位区段抗原 诊断
• 年，卷（期）: 2020,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 670-674
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|R392.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2020.06.007

摘要

目的:制备高活性新型冠状病毒N蛋白的优势表位区段抗原,并初步评价该抗原在新型冠状病毒肺炎诊断中的应用价值.方法:利用生物学软件分析N蛋白的B细胞表位分布,选取含有优势表位的抗原区段,然后用分子生物学技术进行克隆表达获得纯化抗原,ELISA初步评价该优势表位区段抗原的检测性能.结果:经过分析筛选确定15～215 aa为优势表位抗原区段,并获得了高效表达抗原.经过Biocore结合实验,确定优势表位区段抗原NP15-215可以与新型冠状病毒肺炎患者血清样本发生特异性抗原抗体反应.基于该抗原建立的IgM和IgG间接ELISA方法,对临床样本的检测灵敏度分别为60.87％、95.65％,特异性分别为90％、100％.NP-IgM检测的AUC值为0.797,NP-IgG检测的AUC值为0.998.结论:优势表位区段抗原NP15-215可用于NP抗体检测,利用该抗原建立的NP-IgM/IgG间接ELISA检测方法可以很好地区分新型冠状病毒肺炎患者和健康者.