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摘要:
为制备具有活性的猪瘟ELISA抗体检测试剂盒包被抗原,本研究将猪瘟病毒E2蛋白主要抗原表位区A-D部分基因插入表达载体pET-28a中,构建重组质粒pET-28a-E2AD,将其转化至大肠杆菌Transetta(DE3)感受态细胞中进行诱导表达.对IPTG浓度和诱导时间进行优化,确定在37℃条件下、IPTG终浓度为0.2 mmol/L时诱导表达4 h,E2AD蛋白的表达量最高.通过对包涵体的纯化条件进行摸索,最终获得目的蛋白的浓度为0.2 g/L.Western blot分析结果显示,E2AD蛋白能够被猪瘟阳性血清特异性识别,表明纯化后的E2AD蛋白具有良好的反应原性.该结果为进一步开展猪瘟ELISA抗体检测试剂盒的研制工作奠定了基础.
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文献信息
篇名 猪瘟病毒E2蛋白A-D抗原表位区的原核表达与蛋白纯化
来源期刊 福建畜牧兽医 学科
关键词 猪瘟病毒 E2蛋白 蛋白纯化
年,卷(期) 2020,(3) 所属期刊栏目 调查研究
研究方向 页码范围 24-28
页数 5页 分类号
字数 4565字 语种 中文
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1 潘小慧 1 0 0.0 0.0
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福建畜牧兽医
双月刊
1003-4331
35-1103/S
大16开
福州市鼓屏路183号
34-81
1979
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