山柰酚调控PI3K/Akt/mTOR通路诱导人结直肠癌RKO细胞自噬

• 作者: 刘微 徐勤芬 王恺纯 胡道德 顾超
• 来源期刊: 中南药学
• 学科: 医学
• 关键词: 山柰酚 结直肠癌 RKO细胞 自噬 PI3K/Akt/mTOR信号通路
• 年，卷（期）: 2020,（10）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1668-1673
• 页数: 6页
• 分类号: R285
• 语种: 中文
• DOI: 10.7539/j.issn.1672-2981.2020.10.010

摘要

目的 研究山柰酚对人结直肠癌RKO细胞增殖和自噬的影响及其诱导自噬的作用机制.方法 CCK-8法检测山柰酚溶液处理RKO细胞24 h和48 h后的细胞活力,计算半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测山柰酚对RKO细胞周期的影响;TUNEL染色检测山柰酚对RKO细胞凋亡的影响;MDC荧光染色检测山柰酚对RKO细胞自噬的影响;Western blot检测山柰酚处理RKO细胞后自噬相关蛋白Beclin1和LC3及信号通路蛋白PI3K、Akt、p-Akt、mTOR和p-mTOR的表达水平.结果 山柰酚处理RKO细胞24 h和48 h后的IC50分别为(41.52±1.09)、(25.07±0.81)mg·L-1.山柰酚能阻滞RKO细胞周期停留在G0/G1期.TUNEL染色实验显示山柰酚可诱导RKO细胞凋亡,且呈现浓度依赖性.MDC荧光染色结果表明,山柰酚诱导RKO细胞自噬体的形成,而自噬抑制剂3-MA可抑制山柰酚诱导RKO细胞自噬体的形成.Western blot结果显示,在山柰酚的作用下,RKO细胞中自噬标志蛋白Beclin1表达水平上升、LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比值降低;而3-MA抑制山柰酚引起的Beclin1蛋白表达水平上升和LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ比值降低.信号通路蛋白研究表明,山柰酚显著降低PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达,而Akt和mTOR蛋白表达量无明显变化.结论 山柰酚可抑制人结直肠癌RKO细胞增殖并诱导其凋亡,同时可能通过下调PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导RKO细胞自噬.