近暗散白蚁 β-葡萄糖苷酶RpBgl7的异源表达及酶学性质研究

• 作者: 刘茜 宋安东 张宏森 毛国涛 王方园 苏丽娟
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 近暗散白蚁 β-葡萄糖苷酶 大肠杆菌宿主 融合表达 纯化 酶学性质 金属离子耐受性
• 年，卷（期）: 2020,（7）
• 所属期刊栏目: 农业资源与环境
• 页码范围: 68-74
• 页数: 7页
• 分类号: S763.3
• 字数: 4139字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.07.009

摘要

为研究近暗散白蚁(Reticulitermes perilucifugus)β-葡萄糖苷酶RpBgl7,利用生物信息学分析β-葡萄糖苷酶RpBgl7的家族及结构特点,构建RpBgl7的重组表达载体pCold-TF-RpBgl7,在大肠杆菌中过量表达并纯化,分析其最适反应条件和酶动力学参数.结果表明,RpBgl7属于糖苷水解酶1家族,具有2个保守的谷氨酸催化残基Glu187和Glu394.RpBgl7在BL21(DE3)中过量表达,经过镍离子亲和层析1步纯化可得到高纯度RpBgl7重组蛋白.以4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷为底物,测得RpBgl7的最适pH值为6.0,最适温度为70℃;动力学参数K m=0.13 mmol/L,kcat=3.15 s-1.RpBgl7可耐受Na+、K+、Mg2+、Cu2+和Ba2+,而Ca2+、Hg2+和Fe3+明显抑制RpBgl7的酶活力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋安东	河南农业大学生命科学学院	147	1485	21.0	31.0
2	苏丽娟	河南农业大学生命科学学院	44	160	7.0	10.0
3	刘茜	河南农业大学生命科学学院	7	82	3.0	7.0
4	毛国涛	河南农业大学生命科学学院	5	2	1.0	1.0
5	张宏森	河南农业大学生命科学学院	6	4	1.0	1.0
6	王方园	河南农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0