猪细环病毒Ⅰ型实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 刘东旭 尹柏双 沙万里 苗丽娟 魏佳晋 黄永双
• 来源期刊: 黑龙江畜牧兽医（下半月）
• 学科: 农学
• 关键词: 猪细环病毒Ⅰ型 荧光定量PCR 探针 检测 灵敏性 稳定性 特异性
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 兽医科学
• 页码范围: 69-72,148
• 页数: 5页
• 分类号: S852.65|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13881/j.cnki.hljxmsy.2019.03.0020

摘要

为了建立一种能在临床上快速、准确检测猪细环病毒Ⅰ型(Torque teno sus virus 1,TTSuV1)的实时荧光定量PCR方法,试验根据GenBank上公布的TTSuV1序列中的高度保守片段设计引物及探针,并构建标准质粒;测定标准质粒浓度,以标准质粒为模板建立检测TTSuV1的TaqMan实时荧光定量PCR方法,并对该方法的灵敏度、稳定性和特异性进行评价.结果 表明:构建的标准质粒浓度为3.3× 1011 copeis/μL;建立的实时荧光定量PCR最佳退火温度为54.5℃,最佳引物浓度为0.8 mol/μL,探针浓度为0.4 mol/μL;所建立的实时荧光定量PCR检测方法具有良好的灵敏性、稳定性和特异性.说明该检测方法可应用于临床检测TTSuV1.