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摘要:
酶标抗体的稳定性对酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)至关重要,但常规化学偶联方法制备的酶标抗体具有热稳定性不足的缺点,这限制了酶标抗体在ELISA中的应用.本研究利用基因工程技术克隆表达出碱性磷酸酶与特异性鲨鱼单域抗体的融合蛋白,并对融合蛋白的亲和力和热稳定性进行了研究.结果 表明:在16℃下,0.05 mmol/L的异丙基β-D-1-硫代半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导可实现融合蛋白的可溶性表达,表达出的融合蛋白分子量约为63 kDa,与目标抗原的亲和常数可达7.80×10-8 mol/L,具有良好的抗原结合能力;融合蛋白在58℃处理180 min后热稳定性良好,证明该融合蛋白可以作为ELISA检测中一种潜在的免疫诊断剂.
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关键词云
关键词热度
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文献信息
篇名 鲨鱼单域抗体-碱性磷酸酶融合蛋白的表达及热稳定性分析
来源期刊 食品工业科技 学科 工学
关键词 鲨鱼单域抗体 碱性磷酸酶 融合蛋白 亲和力 热稳定性
年,卷(期) 2020,(21) 所属期刊栏目 生物工程
研究方向 页码范围 110-115
页数 6页 分类号 TS201.6
字数 语种 中文
DOI 10.13386/j.issn1002-0306.2020020051
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 刘鑫 39 499 11.0 22.0
2 隋建新 27 135 8.0 10.0
3 曹立民 44 382 11.0 17.0
4 屈跃宽 5 1 1.0 1.0
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研究主题发展历程
节点文献
鲨鱼单域抗体
碱性磷酸酶
融合蛋白
亲和力
热稳定性
研究起点
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
食品工业科技
半月刊
1002-0306
11-1759/TS
大16开
北京永外沙子口路70号
2-399
1979
chi
出版文献量(篇)
29192
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200094
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