抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白表达条件的初步研究

• 作者: 刘细霞 孙远明 张宏斌 杨金易 沈玉栋 王弘 雷红涛
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 克伦特罗 单链抗体 碱性磷酸酶 融合蛋白 表达条件
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 161-165
• 分类号: TS201.1
• 语种: 中文

摘要

初步研究抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(CBSscFv-AP)的表达条件,提高CBLscFv-AP融合蛋白的表达量.采用液体发酵法培养抗克伦特罗单链抗体-碱性磷酸酶融合蛋白(CBLscFv-AP)基因工程菌,研究不同宿主菌、初始pH、诱导时期、诱导时间和培养基对CBLscFv-AP融合蛋白表达量的影响以及重组质粒的稳定性.选用E.coli BL21(DE3)pLysS为宿主菌,在初始pH为7.4的LB培养基中培养至A600nm为0.8～0.9时,诱导表达8h,为CBLscFv-AP融合蛋白最佳表达条件.而且重组质粒pBV220-scFv-phoA具有较好的结构稳定性.在该表达条件下,提高了CBLscFv-AP融合蛋白的表达量,为进行大规模发酵生产CBLscFv-AP融合蛋白奠定基础.