指环病毒7型、8型与10型实时荧光定量PCR检测体系的建立

• 作者: 夏志强 宋娟 夏冬 宋芹芹 王文军 王瑞芳 史冰田 刘宓 胡耕 王衍海 韩俊
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 关键词: 指环病毒 实时荧光定量PCR 特异性 敏感性 血清样本
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 检测技术
• 页码范围: 190-194
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.cn112309-20200921-00444

摘要

目的:建立指环病毒7型(TTV7)、8型(TTV8)、10型(TTV10)实时荧光定量PCR检测体系并进行临床验证。方法:本研究根据GenBank已发布的TTV7、TTV8、TTV10基因序列设计特异性引物，构建重组质粒pMD19-T-TTV7、pMD19-T-TTV8、pMD19-T-TTV10，以其作为阳性标准品建立了基于FAM-Eclipse探针法的实时荧光定量PCR检测，并进行特异性、敏感性试验与临床样本检测。结果:TTV7、TTV8、TTV10的实时荧光定量PCR检测体系标准曲线方程分别为 y＝-0.340 2 x+114.780 0、 y＝-0.351 1 x+114.940 0、 y＝-0.348 9 x+115.020 0，相关系数都在0.99以上，与其他病毒无交叉反应，检测敏感性分别为108拷贝/μl、84拷贝/μl、98拷贝/μl。在临床小儿血清样本中的检测阳性率分别为10.9%、2.1%和4.3%。 结论:本研究建立的TTV7、TTV8、TTV10实时荧光定量PCR检测体系具有特异性强、灵敏性高等特点，可为临床血清样本TTV检测提供一个快速手段。