单核细胞增生李斯特菌质粒DNA参考物质的研制

• 作者: 蒲泽南 林晓峰 袁暮云 努色热提·阿布都沙拉木 许龙岩 陈瑶
• 来源期刊: 中国食品卫生杂志
• 关键词: 单核细胞增生李斯特菌 合成质粒标准品 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2021,（3）
• 所属期刊栏目: 实验技术与方法|Experimental Technique and Method
• 页码范围: 279-284
• 页数: 6页
• 分类号: R155
• 语种: 中文
• DOI: 10.13590/j.cjfh.2021.03.007

摘要

目的 研制一种能够用于快速鉴定单核细胞增生李斯特菌(以下简称单增李斯特菌)的质粒DNA标准物质.方法 设计一种质粒DNA包含目前常用于单增李斯特菌检测的hlyA、plcB、inlA基因,并对其稳定性、均匀性和量值可追溯性进行评价.评估其在实时定量聚合酶链式反应(PCR)检测中的适用性.结果 质粒DNA参考物质的最终定值结果为29.85 μg/mL.该质粒DNA参考物质量值可靠,均匀性和稳定性良好,可以在-20℃下保存1年以上.质粒DNA参考品在实时荧光PCR检测中的适用性证明,可以保证实时定量PCR检测结果与单增李斯特菌基因组DNA参考品具有可比性.结论 研制的质粒DNA标准物质可以替代单增李斯特菌基因组DNA对单增李斯特菌进行质量监控,满足单增李斯特菌检测在实验室质量的有效控制和试验方法验证的需要.