羊口疮病毒B2L截短重组蛋白刺激小鼠产生特异性抗体的研究

• 作者: 刘丽佳 孙正楠 向华 杨发龙 张焕容
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 关键词: 羊口疮病毒 B2L截短重组蛋白 亚单位疫苗 中和抗体 黏膜免疫
• 年，卷（期）: 2021,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 66-73
• 页数: 8页
• 分类号: S852.659.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0020

摘要

为研究羊口疮病毒(ORFV)新型亚单位疫苗,设计了ORFV B2L优势抗原表位截短重组蛋白,命名为HBBH并经原核表达和鉴定.以不同剂量HBBH不加或加不同佐剂,经滴鼻或颈部皮下注射免疫BALB/c小鼠,其中滴鼻共4组(HBBH 10 μg、20 μg、30μg和20 μg+LTB),注射组(HBBH 20 μg+201 佐剂).同时设ORFV组织灭活抗原+201佐剂注射免疫对照和空白对照,每组共免疫3次,每次间隔7d.HBBH间接ELISA检测一免、二免、三免后7d以及三免后14d血清中ORFV IgG、IgA和三免后14d肺灌洗液sIgA的抗体水平,取不同水平的IgG ELISA阳性血清检测细胞中和抗体效价.结果显示,表达并鉴定了具有良好反应原性的包含ORFV B2L蛋白优势抗原表位的截短重组蛋白HBBH.免疫小鼠试验结果表明,不同剂量HBBH通过滴鼻或颈部皮下注射均可刺激小鼠产生ORFV特异性IgG抗体,20 μgHBBH+201佐剂注射免疫能最大刺激小鼠血清IgG抗体的产生.实验小鼠三免后14 d肺灌洗液特异性sIgA仅在HBBH滴鼻免疫剂量≥20 μg的三个组中检测到,其中30 μgHBBH组刺激小鼠产生了最高水平的sIgA.在同为20 μg HBBH滴鼻免疫时,添加LTB佐剂刺激小鼠产生了更高水平的sIgA.表明一定剂量的HBBH+LTB佐剂滴鼻免疫可更好地刺激小鼠产生sIgA.HBBH间接ELISA IgG阳性血清的细胞中和抗体效价可高达1∶128,且能中和4株ORFV分离株.结果表明,20 μgHBBH+201佐剂注射免疫3次和20 μg HBBH+LTB佐剂滴鼻免疫3次均能刺激BALB/c小鼠产生高水平的抗ORFV血清中和抗体IgG和黏膜抗体sIgA.本研究为ORFV B2L优势抗原表位截短重组蛋白作为亚单位疫苗提供了数据支持.