抑制HBV核心启动子转录活性的化合物筛选与鉴定

• 作者: 孙瑜雪 魏霞飞 李杰 崔静 王瑜伟 胡接力
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 关键词: 逆转素 乙型肝炎病毒 核心启动子 细胞模型 药物筛选
• 年，卷（期）: 2021,（13）
• 所属期刊栏目: 基础医学|Basic Medicine
• 页码范围: 1192-1203
• 页数: 12页
• 分类号: R373.21|R965.1|R978.7
• 语种: 中文
• DOI: 10.16016/j.1000-5404.202101014

摘要

目的 构建靶向核心启动子转录的稳定细胞系,筛选影响乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)转录的药物.方法 利用HepG2细胞,以重组慢病毒的方式构建由HBV核心启动子驱动的Gaussia荧光素酶稳定表达细胞系(HepG2-Pcore-Gluc).通过检测荧光素酶活性来反映核心启动子的活性变化情况.在HBV复制细胞模型中,通过Southern blot、荧光定量PCR等进一步评估经多轮筛选得到的化合物对HBV RNA、HBV DNA的影响.结果 利用HepG2-Pcore-Gluc细胞模型筛选1450种小分子化合物,第1轮筛选到41种化合物,能影响荧光素酶活性2倍以上.将这41种化合物进行第2轮剂量依赖性测试,得到2种化合物:逆转素(Reversine)、SCH58261.进一步验证发现:Reversine在瞬时转染HBV1.3倍体的HepG2和HepG2.2.15细胞中,能够有效降低HBV RNA、HBV DNA以及HBeAg、HBsAg的水平.结论 建立了一种新型、高效的抗乙肝药物筛选细胞模型(HepG2-Pcore-Gluc),利用该模型筛选到一种新型分子Reversine,该分子可以通过抑制HBV核心启动子的转录活性来抑制HBV RNA的转录.