里氏木霉翻转酶DRS2对木质纤维素降解酶基因表达及分泌的影响

• 作者: 杨鑫 何若男 江贤章 刘晓东 秦丽娜
• 来源期刊: 微生物学报
• 关键词: 里氏木霉 翻转酶 纤维素酶 蛋白分泌 基因敲除
• 年，卷（期）: 2022,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告|RESEARCH ARTICLES
• 页码范围: 1549-1562
• 页数: 14页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20210652

摘要

[目的]本研究以工业生产菌株里氏木霉为研究对象,鉴定翻转酶基因drs2对其纤维素酶表达及分泌的影响.[方法]首先通过BLAST序列比对,从里氏木霉中鉴定出翻转酶基因drs2,并通过同源重组的方法在里氏木霉中构建了drs2基因的敲除菌株△drs2.对△drs2菌株及其对照株在不同碳源上的生长发育、蛋白分泌、纤维素酶及半纤维素酶的表达水平等进行比较分析,并对DSR2蛋白进行了亚细胞定位.[结果]与对照菌株Cpyr4相比,△drs2菌株在葡萄糖、乳糖、微晶纤维素(avicel)等条件下生长速率都明显降低.△drs2菌株在纤维素诱导条件下的总蛋白分泌量、纤维素酶活力、半纤维素酶活力均显著提高,但drs2基因的缺失并不影响关键纤维素酶基因的转录水平.DRS2蛋白位于里氏木霉菌丝近顶端的顶体位置.[结论]在纤维素为唯一碳源的条件下,drs2基因的缺失导致纤维素酶的产量显著提高,drs2基因不调控纤维素酶基因的转录,而是在其分泌过程中发挥作用.