镉胁迫下构树qRT-PCR内参基因筛选及验证

• 作者: 李红英 陈萌笛 王政博 郝自远 刘龙昌 赵西平 倪建伟
• 来源期刊: 林业科学研究
• 学科: 农学
• 关键词: 构树;内参基因;Cd胁迫;荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2025,（4）
• 页码范围: 133-142
• 页数: 10页
• 语种: 中文

摘要

[目的]筛选出镉（Cd）胁迫下构树中稳定表达的内参基因，为后续开展构树耐Cd的分子机理研究奠定基础。[方法]以Cd胁迫下构树的根和叶组织为材料，通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测10个候选基因（BpUBE2、 BpRPL8、 Bp Actin、 BpGAPDH、 BpHSP、 BpTUA、 BpDOUB、 Bpβ-TUB、 BpHIS、BpNADH）的表达情况，利用geNorm、NormFinder、BestKeeper和RefFinder分析软件对候选内参基因的表达稳定性进行综合评估，并通过逆境胁迫响应基因BpDREB验证筛选出的内参基因的稳定性。[结果]BpDOUB和BpNADH在Cd胁迫下构树中基因表达相对稳定，BpGAPDH表达稳定性最差。以BpDREB验证内参稳定性时发现，单独或组合使用BpDOUB及BpNADH为内参基因时，BpDREB基因表达水平显示出相似的趋势，而稳定性较差的BpGAPDH基因未能对BpDREB的表达量进行准确校正。[结论]BpDOUB、BpNADH基因以及Bp DOUB+BpNADH基因组合均可作为合适的内参基因，提高Cd胁迫下构树相关基因表达分析的可靠性。