葡萄不同摘心处理下qRT-PCR内参基因的筛选与验证

• 作者: 张静 潘红 王琦 赖呈纯 陈源 高慧颖 黄贤贵
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 葡萄 摘心 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) 内参基因 表达稳定性
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 园艺科学
• 页码范围: 890-900
• 页数: 11页
• 分类号: S663.1|Q786
• 字数: 5517字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13836/j.jjau.2019102

摘要

摘心处理是保证葡萄产量和品质的关键栽培技术之一,选择稳定可靠的内参基因,有利于葡萄摘心响应分子机制相关基因表达的研究.本研究以不同摘心处理的葡萄叶片和茎杆为材料,利用qRT-PCR分析15个候选内参基因Actin、AP-2、Cyclophilin、EF1-α、GAPDH、VAG、SAND、α-Tubulin、β-Tubulin、UBQ-L40、NAD5、ADH2、60SRP、18S rRNA、UBQ等在所供材料中的转录水平,并用RefFinder软件对候选内参基因稳定性进行综合评价.试验结果表明,葡萄叶片为材料的试验体系的最稳定内参基因为SAND和VAG,而葡萄茎杆为材料的试验体系以AP-2和Actin为最稳定的内参基因,且采用双内参基因组合,可以进一步提高试验结果的精确度;通过目的基因VvSS4转录水平数据标准化的验证,所获得的2组内参基因在各自的试验体系中可靠性高,可用于后续相关目的基因定量表达的研究.