马铃薯Y病毒普通株系外壳蛋白基因的克隆与原核表达载体的构建

• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 马铃薯Y病毒普通株系(PVY~0) 外壳蛋白基因 克隆与测序 表达载体构建
• 年，卷（期）: 1998,（4）
• 页码范围: 67-70
• 页数: 4页
• 分类号: Q78,S435.32
• 语种: 中文

摘要

本研究报道马铃薯Y病毒普通株系(PVY0)外壳蛋白基因CDNA克隆,全序列分析及其原核表达载体构建的结果.从感染PVY的烟草(N.TOBACUMCV,SAMSUN)叶片中提取病毒粒体,SDS－酚法提取病毒核酸.以所提核酸为模板,用一对PVYCP基因引物进行RT－PCR,扩增了0.80KB的特异性核苷酸片段.该片段大小与国外报道的PVYCP基因一致.将PCR产物插入到克隆载体PGEM7ZF(+)中转化大肠杆菌DH5α.经限制酶酶切鉴定,重组克隆中含有与PCR产物大小相同的0.80KB的插入片段.CD－NA全序列分析结果表明,核苷酸及其所推出的氨基酸序列与国外报道的PVY0同源率分别为96.5％和97.0％.同时还构建了该基因在细菌中的表达载体,表达载体在大肠杆菌中的诱导表达实验在进行中.