柯萨奇病毒B组3型中国分离株VP1基因真核表达系统的克隆

• 作者: 叶鸿瑁 唐伟 孟繁超 安毅 沈景霞 田野 赵铁强 钟学宽 钟照华 鲁凤民 黄建林 黄永麟
• 来源期刊: 中国地方病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 柯萨奇病毒B组3型 VP1基因 真核表达系统
• 年，卷（期）: 1999,（3）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 169-172
• 页数: 4页
• 分类号: R373.23
• 字数: 2158字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-4955.1999.03.004

摘要

目的探讨构建柯萨奇病毒B组3型(CVB3)基因疫苗的可行性.方法应用逆转录PCR技术扩增CVB3中国分离株VP1基因,通过TA克隆法构建pCR2.1-CVB3VP1,将CVB3VP1亚克隆至真核表达载体pCEP4,构建真核表达系统pCEP4-CVB3VP1,并进行酶切和测序鉴定.结果发现CVB3的中国分离株与Nancy株的VP1基因基本一致,均编码293个氨基酸,其中有59处核苷酸存在变异,但仅改变了10处氨基酸编码,证实克隆的片段为CVB3VP1基因,表达载体为pCEP4.结论实验成功地构建了CVB3中国分离株的真核表达系统pCEP4-CVB3VP1,为CVB3基因疫苗的研究奠定了基础.