柯萨奇病毒A组16型衣壳蛋白VP1的原核表达

• 作者: 孙园园 张春艳 李玉林 王云龙 王继创 程蕾 米海 邓黎黎
• 来源期刊: 动物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 柯萨奇病毒 VP1基因 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 10-14
• 页数: 5页
• 分类号: Q789
• 字数: 4287字
• 语种: 中文

摘要

构建柯萨奇病毒A组16型(CVA16)衣壳蛋白VP1重组质粒pET-41a(+)/VP1,优化诱导表达条件,进行原核表达及蛋白纯化.通过PCR扩增获得VP1基因片段并转进大肠埃希菌E.coli BL21(DE3)内进行表达.从时间、温度、诱导剂浓度三个方面优化表达条件,收集表达菌体,经镍柱和DEAE柱纯化后,用蛋白印迹检测免疫反应性.结果表明,目的蛋白为包涵体,分子质量约为61 ku,与设计蛋白分子质量大小相符,以诱导5h、IPTG的浓度为0.20 mmoL/L、温度为37℃时蛋白表达量最高.纯化后蛋白纯度达到94％,蛋白印迹检测具有免疫反应性.试验成功获取了柯萨奇病毒A组16型(CVA16) VP1蛋白,且该蛋白具有免疫反应性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李玉林		35	123	7.0	9.0
2	王云龙		14	88	6.0	9.0
6	王继创		16	50	3.0	6.0
7	程蕾		10	32	3.0	5.0
8	米海		2	2	1.0	1.0
9	邓黎黎		3	3	1.0	1.0
10	张春艳		1	1	1.0	1.0