含内蛋白子融合表达载体的构建与人神经营养因子-3的初步表达

• 作者: 李卓玉 樊峥 王如景 范俊虎
• 来源期刊: 山西大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: pExIC-hNT-3 表达 内蛋白子 DTT剪切
• 年，卷（期）: 2000,（3）
• 页码范围: 250-253
• 页数: 4页
• 分类号: Q81
• 字数: 2622字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-2395.2000.03.018

摘要

为了构建一个含蛋白质剪接元件的表达载体,将3.38 kb的pExSec Ⅰ的多克隆位点(EcoR Ⅰ/BamH Ⅰ)处插入一个含多个酶切位点的49 bp寡聚核苷酸.然后将pMYB129中intein-CBD基因片段移插入上述经改造的pExSec I中,构建成含内蛋白子的表达载体pExIC.根据人神经营养因子-3(hNT-3)的已知DNA序列,设计含Nde I/Xho I酶切位点的引物,用PCR法从人全血总DNA中扩增hNT-3,再插入pExIC载体中,构建成pExIC-hNT-3重组质粒.经转化后,工程菌E.coli BL21(DE3)/pExIC-hNT-3在LB培养基中获得融合表达,根据intein的自剪切原理,在还原剂DTT作用下,初步获得了约14 kD的hNT-3目的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李卓玉	山西大学生物工程实验室	40	126	5.0	9.0
2	范俊虎	山西大学生物工程实验室	7	21	3.0	4.0
3	樊峥	山西大学生物工程实验室	1	0	0.0	0.0
4	王如景	山西大学生物工程实验室	1	0	0.0	0.0