抗人VEGF165单链抗体的构建与表达

• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人VEGF165 单链抗体 原核表达
• 年，卷（期）: 2000,（2）
• 页码范围: 92-95
• 页数: 4页
• 分类号: Q58
• 字数: 2712字
• 语种: 中文

摘要

目的 为降低鼠源抗体对人体的免疫原性，构建表达厂VmD11链抗体。方法 用overlap PCR构建出单链抗体的基因，克隆入表达载体pKpL—3a，在大肠杆菌pop2136中表达，采用抗原结合ELISA和竞争抑制ELISA测定活性。结果经SDS-PAGE检测，诱导后的细菌表达了26kD的蛋白；Western Blot证实该蛋白为表达的单链抗体。经变性、复性后，该单链抗体可特异结合人VEGF165抗原，并与VmD11具有相同的抗原结合位点。结论成功构建和表达了抗人VEGF165单链抗体，可望进一步应用于肿瘤复发转移的诊治研究。