人ureb1在大肠杆菌中高效表达及其抗体的制备

• 作者: 明文玉 林学颜 银巍 顾军
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人ureb1DNA重组原核表达载体抗体
• 年，卷（期）: 2001,（5）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 228-231
• 页数: 4页
• 分类号: Q784|Q939.91
• 字数: 3298字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建人的ureb1(hureb1)原核高效表达重组质粒，以此表达的外源蛋白为抗原制备抗ureb1的抗体。方法：用XhoI/Not I从pGU-2质粒酶切得到hureb1的ORF与pGEX-4T-2的XhoI/NotI大片段连接，构建表达GST-hureb1融合蛋白的重组载体。转化大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导表达。以粗制的GST-hurebl融合蛋白分别免疫大白兔和小鼠，制备抗hureb1的多克隆抗体和单克隆抗体，采用Westem Blot进行特异性鉴定。结果：构建了高效表达GST-hureb1融合蛋白的原核表达载体，融合蛋白的表达量占菌体蛋白质总量的33.45％。以大肠杆菌表达的GST-hureb1融合蛋白免疫动物制备了高滴度、高特异性的抗hureb1的抗体。结论：利用重组GST-hureb1融合蛋白免疫动物可获得高滴度的抗hureb1抗体。重组GST-hureb1融合蛋白和抗hureb1的抗体可用于hureb1的生物学功能研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	明文玉	中山医科大学分子医学研究中心	6	66	4.0	6.0
2	林学颜	中山医科大学分子医学免疫学教研室	10	77	4.0	8.0
3	顾军	中山医科大学分子医学研究中心	5	63	3.0	5.0
4	银巍	中山医科大学分子医学研究中心	6	90	4.0	6.0