幽门螺杆菌融合蛋白HspA-UreB在大肠杆菌中的表达与鉴定

• 作者: 代丽萍 段广才 范清堂
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 hspA ureB 融合蛋白 基因表达
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 843-846
• 页数: 4页
• 分类号: R573.2
• 字数: 2589字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2004.10.006

摘要

目的在大肠杆菌中表达幽门螺杆菌(简称Hp)HspA-UreB融合蛋白,并探索其免疫反应性,为Hp基因工程疫苗的研制奠定基础.方法用PCR方法扩增郑州分离Hp菌株MEL-HP27的hspA 和ureB基因,分别克隆入pNEB193中.测序后,回收两种基因片段,并以hspA-ureB的顺序连接插入原核表达载体pMAL-C2x进行融合表达.采用蛋白印迹法对表达产物进行鉴定.结果特异PCR法和酶切鉴定证实融合基因hspA-ureB克隆入表达载体中;重组质粒转化大肠杆菌TB1后,经IPTG诱导3h,SDS-PAGE电泳显示在119 kDa处出现一条特异蛋白带,即麦芽糖结合蛋白(MBP)与HspA-UreB的融合表达形式,约占细菌总体蛋白含量的31%;该融合蛋白与Hp免疫小鼠血清和Hp阳性病人血清的Western blot分析结果显示,在119 kDa处出现特异杂交带.结论成功地在大肠杆菌中实现了Hp融合蛋白HspA-UreB的高效表达,并证实其具有良好的免疫反应性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段广才	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	174	980	15.0	21.0
5	代丽萍	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	53	273	9.0	13.0
9	范清堂	郑州大学河南省分子医学重点学科开放实验室	27	106	6.0	8.0