幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白的诱导表达与活性鉴定

• 作者: 代丽萍 段广才 纪晋文 郗园林
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 螺杆菌,幽门 HspA-UreB融合蛋白 基因表达 包涵体
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 724-727
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3493字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-587X.2005.05.020

摘要

目的:优化幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白诱导表达的条件,以提高目的蛋白的产量.方法:表达幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白的重组基因工程菌BL21(pET-HU27)在不同温度下(25℃、37℃)以不同的IPTG浓度(0.3、1.0和2.0 mmol·L-1)和不同的培养基(LB、SOC)中分别诱导表达不同时间,表达产物经超声破碎后,进行融合蛋白可溶性分析,并用Western blotting对表达产物进行鉴定.结果:SDS-PAGE结果显示,37℃时,LB培养基中,0.3 mmol·L-1的IPTG浓度诱导5 h时,融合蛋白的含量最高为21.51%;25℃,SOC培养基中,1.0 mmol·L-1的IPTG浓度诱导8 h时,可溶性HspA-UreB融合蛋白含量最高为34.58%,表达产物能够被免疫小鼠血清识别.结论:实现了幽门螺杆菌HspA-UreB融合蛋白在原核细胞中的高效表达,并具有良好的免疫活性,为进一步开发应用以该融合蛋白为抗原的幽门螺杆菌疫苗打下了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段广才	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	174	980	15.0	21.0
2	代丽萍	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	53	273	9.0	13.0
3	郗园林	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	119	673	13.0	20.0
4	纪晋文	郑州大学公共卫生学院流行病学教研室	3	7	1.0	2.0