结核分支杆菌ESAT6蛋白的表达、纯化及抗原性研究

• 作者: 刘军 史迎昌 吴雪琼 夏湘萱 张俊仙 李洪敏 金关甫
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: ESAT6 基因表达 血清学诊断 分支杆菌 结核
• 年，卷（期）: 2001,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 14-17
• 页数: 4页
• 分类号: R52
• 字数: 3657字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2001.09.007

摘要

目的:获得重组ESAT6蛋白,研究其免疫学特性,评价其在结核病血清学诊断中的价值.方法:分别用生理盐水和卡介苗免疫小鼠8周后,以结核分支杆菌接种小鼠.应用基因工程技术表达、纯化ESAT6蛋白,分别以结核分支杆菌PPD或纯化的rESAT6蛋白为抗原,通过ELISA方法及结核病一步法检测小鼠或人血清中抗结核抗体.结果:重组质粒pET24b-ESAT6在大肠杆菌BL2(DE3)细胞内以包涵体形式存在,分子量约6kDa,每100ml培养菌可获得约18mg纯化的重组蛋白.生理盐水和卡介苗免疫小鼠血后血清中抗ESAT6抗体无区别;结核分支杆菌攻击后,两组小鼠血清中抗ESAT6抗体均明显升高,但只有卡介苗组小鼠抗体水平超过平均值+2标准误.以33例正常人血清的OD值+2S为正常界限值,33例正常人和32例结核病人血清一步法和PDD、rESAT6 ELISA检测抗结核抗体的特异性和敏感性分别为:一步法87.9%(29/33)、65.6%(21/32);PPD 93.9%(31/33)、62.5%(20/32);rESAT6 97%(32/33)、18.2%(4/32).结论:pET24b-ESAT6大肠杆菌工程菌能以包涵形式高效表达重组ESAT6蛋白,卡介苗免疫对血清中抗ESAT6抗体无影响,结核病人血清中抗ESAT6抗体阳性率低,rESAT6纯化蛋白可作为结核病血清学诊断的混合抗原之一.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李洪敏	解放军309医院结核病研究中心	23	117	7.0	10.0
2	金关甫	解放军309医院结核病研究中心	14	91	6.0	9.0
3	张俊仙	解放军309医院结核病研究中心	9	141	6.0	9.0
4	吴雪琼	解放军309医院结核病研究中心	17	257	8.0	16.0
5	刘军	解放军309医院结核病研究中心	26	160	8.0	12.0
6	夏湘萱	解放军309医院结核病研究中心	4	60	4.0	4.0
7	史迎昌	解放军309医院结核病研究中心	6	47	3.0	6.0