中国强毒力赖型钩端螺旋体外膜蛋白基因的克隆表达及对大肠杆菌活力的影响

• 作者: 张会东 晏菊芳 胡昌华 谢勇恩 邱洪宇 鲍朗
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 钩端螺旋体属 基因表达 质粒
• 年，卷（期）: 2001,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 705-709
• 页数: 5页
• 分类号: R377+.5
• 字数: 4190字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2001.08.001

摘要

目的:构建表达致病性赖型017株钩端螺旋体OmpL1外膜蛋白的真核-原核穿梭表达载体,并在原核细胞中表达出目的蛋白.方法:用PCR方法从017株钩体基因组中钓出OmpL1蛋白基因,酶切纯化后与质粒pBK-CMV连接,通过电泳、限制性内切酶分析及PCR鉴定筛选出正确重组质粒.重组质粒在大肠杆菌中诱导表达后提取总蛋白以SDS-PAGE检测表达情况,同时监测目的蛋白表达前后各时段宿主菌OD600值的变化.结果:筛选出5株带重组质粒菌,其中有4株能在大肠杆菌中表达37 kD的特异蛋白,而且随着该外源蛋白的表达,宿主菌生长各时段的OD600值下降.结论:成功地构建了钩体OmpL1蛋白的穿梭表达质粒,并在大肠杆菌中表达出OmpL1融合蛋白,该异源蛋白的表达导致宿主菌的活力降低.本工作为OmpL1蛋白用于钩体病诊断、疫苗研制和致病机制的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	晏菊芳	华西医科大学病理生理学教研室感染免疫研究室	7	52	4.0	7.0
2	鲍朗	华西医科大学病理生理学教研室感染免疫研究室	10	73	5.0	8.0
3	胡昌华	华西医科大学病理生理学教研室感染免疫研究室	7	64	4.0	7.0
4	张会东	华西医科大学病理生理学教研室感染免疫研究室	8	52	4.0	7.0
5	谢勇恩	华西医科大学病理生理学教研室感染免疫研究室	6	20	3.0	4.0
6	邱洪宇	华西医科大学病理生理学教研室感染免疫研究室	3	14	2.0	3.0