重组幽门螺杆菌热休克蛋白A亚单位的高效表达及其初步纯化

• 作者: 冉向阳 毛旭虎 王缚鲲 田文标 邹全明
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 热休克蛋白A亚单位 重组表达 纯化
• 年，卷（期）: 2002,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 539-542
• 页数: 4页
• 分类号: R378.99
• 字数: 3857字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2002.06.007

摘要

目的在大肠杆菌中高效表达幽门螺杆菌的热休克蛋白A基因(hspA), 并对其初步纯化.方法用巢式PCR扩增hspA基因.经测序证实后, 克隆于表达载体pIM-1中, 转化大肠杆菌.以SDS-PAGE和免疫印迹分析目的蛋白的表达, 并测定N-端氨基酸的序列.采用固相镍离子亲和层析, 对重组hspA进行初步纯化.结果扩增的hspA基因为357 bp, 并在大肠杆菌中得到高效可溶性表达.重组蛋白的表达量最高可达细菌总蛋白的60.5%.免疫印迹及氨基酸测序结果证实, 表达产物为幽门螺杆菌hspA亚单位.固相镍离子亲和层析初步纯化的重组HspA的纯度为87.8%.结论 hspA亚单位的高效表达与初步纯化, 为批量获得Hp亚单位抗原打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王缚鲲	第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室	24	155	7.0	11.0
2	邹全明	第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室	258	1589	19.0	26.0
3	田文标	第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室	9	40	4.0	6.0
4	毛旭虎	第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室	87	417	12.0	16.0
5	冉向阳	第三军医大学临床微生物学及免疫学教研室	4	16	3.0	4.0