小肽多拷贝基因表达载体的构建及其高效表达

• 作者: 包永明 安利佳 张志超 杨青 胡学军
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 小肽多拷贝基因,定向插入,表达载体,EcoT14 Ⅰ,高效表达
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 287-292
• 页数: 6页
• 分类号: Q81
• 字数: 1605字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7626.2002.03.006

摘要

介绍一种快速、高效构建小肽多拷贝基因表达载体的策略,并构建了相应的表达载体pETE-coT.用人工合成的编码28个氨基酸残基的胸腺素α1基因为模型,采用限制酶EcoT14I识别序列CCAAGG为小肽基因两末端序列,利用其酶切后可产生非镜相对称粘性末端,一次连接反应就构建出一系列不同基因拷贝数的表达载体;在小肽基因两端分别引进编码Factor Xa和羟胺蛋白切割位点的序列,表达出的融合蛋白可被Factor Xa和羟胺剪切出不残留任何外源氨基酸的小肽.不同拷贝数的小肽融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中均获得高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	包永明	大连理工大学生物工程系	76	901	16.0	26.0
2	安利佳	大连理工大学生物工程系	201	3121	29.0	45.0
3	杨青	大连理工大学生物工程系	29	142	7.0	11.0
4	张志超	大连理工大学生物工程系	26	135	5.0	11.0
5	胡学军	大连理工大学生物工程系	10	61	5.0	7.0