基因工程人干细胞因子原核表达、纯化及生物学活性研究

• 作者: 卢琳 厉永建 姜波 张意 施群英 蒋应明 陆君燕 陈国友 黄欣
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 工学
• 关键词: 干细胞因子 蛋白纯化 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 126-128
• 页数: 3页
• 分类号: TQ929+.1|TQ937
• 字数: 2153字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2002.02.013

摘要

目的:摸索一种适合于中试生产的重组人干细胞因子(recombinant human stem cellfactor,rhSCF)的发酵表达与纯化工艺.方法:研究不同培养基和热诱导时间对rhSCF表达量影响;探索最佳纯化工艺和各因素对rhSCF得率和生物学活性的影响.结果:rhSCF工程菌在含甘油、酪蛋白水解物、酵母浸出粉、胰蛋白胨及微量元素的培养基中表达量最高.灰度扫描显示热诱导后2 h开始表达,6 h表达量最高,目的蛋白约可达菌体总蛋白30%.高表达蛋白经复性后,可用酸沉淀作粗分离纯化,随后用阳离子交换层析分离,纯度达80%,经反相层析去除二聚体后,最后用DEAE柱浓缩后并经S200转换缓冲液,最终获得纯度＞95%和比活性＞6×105 U/mg的rhSCF制品.结论:成功地建立了注射用rhSCF的中试生产工艺,为随后进行的临床前研究及临床试验奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄欣	第二军医大学免疫学研究所	16	66	4.0	7.0
2	蒋应明	第二军医大学免疫学研究所	12	49	4.0	6.0
3	姜波	第二军医大学长海医院放射科	7	33	3.0	5.0
4	厉永建	第二军医大学免疫学研究所	14	76	5.0	8.0
5	陈国友	第二军医大学免疫学研究所	14	65	5.0	7.0
6	张意	第二军医大学免疫学研究所	11	36	3.0	5.0
7	卢琳	第二军医大学免疫学研究所	3	8	2.0	2.0
8	施群英	第二军医大学免疫学研究所	2	17	2.0	2.0
9	陆君燕	第二军医大学免疫学研究所	1	2	1.0	1.0