抗HBsAg单链抗体靶向干扰素的构建及原核表达

• 作者: 刘妍 夏小兵 成军 方宏清 李克 杨继珍 王刚 董菁 钟彦伟
• 来源期刊: 中华肝脏病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 融合蛋白 干扰素α 单链抗体
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 分子生物学
• 页码范围: 28-30
• 页数: 3页
• 分类号: R57
• 字数: 3124字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j.issn:1007-3418.2002.01.008

摘要

目的构建抗HBsAg人源单链抗体与人干扰素α的融合分子-抗HBsAg单链抗体靶向干扰素,并在大肠杆菌中表达出活性融合蛋白. 方法利用限制性内切酶分别从含有抗HBsAg人源单链抗体与人干扰素α的质粒中切出目的基因,连接到pET22b质粒中,构建成单链抗体靶向干扰素表达载体.利用SDS-PAGE电泳、竞争性抑制实验与抗病毒实验对表达产物进行分析鉴定. 结果构建出含有抗体靶向干扰素融合基因的表达质粒,诱导12h后,在SDS-PAGE上可以观察到相对分子质量约45×104的目的蛋白,竞争性抑制实验与抗病毒实验表明表达的融合蛋白保留了单链抗体的HBsAg特异结合活性与干扰素的抗病毒活性. 结论抗HBsAg单链靶抗体靶向干扰素融合分子的构建及在大肠杆菌中的表达是成功的.