H-2Kb-BSP融合基因在大肠杆菌中的表达与纯化

• 作者: 钱丽 钱书兵 钱关祥
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: H-2Kb 基因表达 纯化 复性
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 30-32
• 页数: 3页
• 分类号: Q786
• 字数: 3192字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1007-8738.2002.01.013

摘要

目的构建可生物素化H-2Kb-BSP 融合基因的表达载体.方法采用PCR技术,从pBluescript(+)-Kb中扩增出H-2Kb基因的胞外区,拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列后,克隆入pET-42b(+)高效表达载体进行诱导表达.并对表达产物进行纯化与复性.结果成功地构建了融合表达载体pET-H  2Kb-BSP,对表达产物进行纯化与复性,并应用仅识别完整构象的抗Kb分子的单克隆抗体对复性后产物进行了检测.证明表达产物已部分恢复了构象.结论获得H-2Kb-BSP融合蛋白的高效表达,为研究在原核系统中表达、纯化与复性,以及进一步利用亲和素在体外构建MHC-I类分子四聚体,探讨免疫识别机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱关祥	上海第二医科大学分子生物学实验中心	39	186	7.0	11.0
2	钱书兵	上海第二医科大学分子生物学实验中心	8	37	5.0	6.0
3	钱丽	上海第二医科大学分子生物学实验中心	8	35	4.0	5.0