酵母双杂合系统BD端血型糖蛋白A表达质粒的构建

• 作者: 傅国辉 姜晓姝 孔宪刚 张宝山 李宏涛
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血型糖蛋白 酵母菌 膜蛋白质类
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 64-67
• 页数: 4页
• 分类号: R363|Q513.2
• 字数: 2532字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2002.01.018

摘要

目的:获得血型糖蛋白A(GPA)cDNA片段,并构建酵母双杂合BD端表达质粒.方法:利用RT-PCR方法,从K562细胞mRNA中扩增GPA cDNA片段,约410bp.测序后将其克隆至pbridge载体上.用醋酸锂法将构建好的pbridge-GPA转染酵母菌AH109,观察其在选择性培养基上的表达情况.结果:克隆到的410bp GPA cDNA编码的氨基酸序列基本与公布序列相同. pbridge-GPA转染酵母菌后,在SD/Gal/-His/Ura培养基上出现1 mm大小白色菌落. 结论: 获得了血型糖蛋白A cDNA克隆,pbridge-GPA对酵母无毒性,不能激活检测基因,可作为酵母双杂合系统中的靶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孔宪刚	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家重点实验室	49	711	13.0	25.0
2	傅国辉	哈尔滨医科大学病理生理学教研室	16	58	4.0	6.0
3	姜晓姝	哈尔滨医科大学病理生理学教研室	17	79	4.0	8.0
4	李宏涛	哈尔滨医科大学病理生理学教研室	3	6	2.0	2.0
5	张宝山	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家重点实验室	4	20	3.0	4.0