一种高效、稳定的分泌型原核表达载体的构建及应用

• 作者: 夏宁邵 张军 李少伟 杨海杰 管保全 罗文新
• 来源期刊: 厦门大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: 原核表达载体 高效表达 分泌 ompT
• 年，卷（期）: 2003,（4）
• 所属期刊栏目: 快讯
• 页码范围: 410-415
• 页数: 6页
• 分类号: Q75
• 字数: 3543字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0438-0479.2003.04.002

摘要

以本室构建的原核表达载体pTO-T7为基础载体,PCR合成ompT引导序列,插入该载体多克隆位点上游,构建了分泌型原核表达载体pTO-OT.将2个外源基因克隆至pTO-OT,2个重组质粒在大肠杆菌中均得以高效表达,表达产量在25%～34%之间.Westem blot分析证实了融合蛋白可被大肠杆菌信号肽酶有效地切割,并具有良好的免疫学活性.对重组表达菌株的连续传代实验证实了该表达载体具有良好的表达稳定性,显示了其在基因工程中的应用价值.