一种新的精子膜蛋白sp18基因的克隆及其在E.coli中的表达

• 作者: 侯健 安晓荣 李瑞国 柏家林 苟克勉 陈永福
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 精子 sp18基因 分子克隆 表达
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 268-272
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4014字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2003.03.011

摘要

利用sp18 mAb筛选小鼠睾丸λgt11-cDNA表达文库,命名为sp18(GenBank登录号:AF129872)的阳性克隆由1 468 bp组成,开放阅读框(open readingframe,ORF)长约429 bp,编码142个氨基酸.起始密码ATG位于第694 bp,终止密码位于第1 122 bp,polyA位于1 245～1 250bp.核苷酸同源性分析表明,sp18cDNA的10,～651bp与人视神经Hr44的532～1 173 bp、sp18cDNA的10～816 bp、864～1 444 bp与牛视神经Hr44的1 408～2 208 bp、2 250～2 309 bp的cDNA序列有很高的同源性,高达98%.推测sp18基因可能是生殖系统存在的一种新基因.sp18编码蛋白的理论分子量约为15.7 kD,有8个N-糖基化位点和12个O-糖基化位点,亲水性分析表明sp18多肽是一种精子跨膜蛋白,跨膜区位于第17～33氨基酸处.将sp18cDNA亚克隆到原核表达载体pET-30a(+),在E. coliBL21(DE3)中得到诱导表达,其表观分子量约为16.5 kD,表达量约占菌体总蛋白的32%.Westernblot分析表明sp18mAb能识别重组的sp18膜蛋白,表明重组蛋白具有免疫原性,为进一步研究sp18基因的功能打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李瑞国	中国农业大学农业生物技术国家重点实验室	4	63	4.0	4.0
2	安晓荣	中国农业大学农业生物技术国家重点实验室	40	302	10.0	16.0
6	苟克勉	中国农业大学农业生物技术国家重点实验室	20	179	6.0	13.0
10	柏家林	中国农业大学农业生物技术国家重点实验室	18	115	4.0	10.0
11	侯健	中国农业大学农业生物技术国家重点实验室	18	102	6.0	9.0