人体c-Mpl分子配体不同表达载体的构建及其优化表达策略

• 作者: 张擎 徐培林 潘瑞敏 葛怡琛
• 来源期刊: 中山大学学报(自然科学版)
• 学科: 生物学
• 关键词: c-Mpl XP1 表达 水溶性 稳定性 活性
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 页码范围: 59-62,81
• 页数: 5页
• 分类号: Q812
• 字数: 3444字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0529-6579.2003.05.016

摘要

利用酵母双杂交系统从人体肝脏cDNA文库筛选到血小板生成素受体Mp1分子配体的xp1基因,构建pET-28(b)-xp1,pBV220-xp1和pBAD/gⅢA-xp1表达质粒,分别进行IPTG、温度和果糖诱导,表达产物利用小鼠巨核细胞集落形成单位测定活性.表达分析显示BL21/pET-28(b)-xp1水溶性XP1目的蛋白表达量为最高,活性最大;BL21/pBV220-xp1被短时、低温诱导后可增加表达目的蛋白的水溶性,但稳定性差,表达量和活性均不及BL21/pET-28(b)-xp1高;TOP10/pBAD/gⅢA-xp1不能分泌到细胞质周膜,以包涵体形式存在细胞内中,并且为无活性表达.