sTRAIL基因的表达、纯化及其生物学活性的初步研究

• 作者: 刘红岩 徐维明 李燕 杨芳 肖红剑 龙海亭
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: TRAIL 基因克隆 原核表达 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 分子生物技术
• 页码范围: 1-5
• 页数: 5页
• 分类号: Q812
• 字数: 3291字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-5673.2003.02.001

摘要

在原核表达系统中表达重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(sTRAIL)分子,纯化表达产物,并进行初步的生物学活性的研究中,通过提取外周血淋巴细胞总RNA进行RT-PCR克隆sTRAIL cDNA,构建sTRAIL的原核表达载体,用限制性酶切和DNA测序进行鉴定,IPTG诱导表达.以发酵罐放大培养,SDS-PAGE和Western-blot确认表达,用亲和层析和阳离子层析纯化表达产物,使用L929、Qay肝癌、K562人白血病等肿瘤细胞鉴定活性.结果发现重组表达的sTRAIL融合蛋白占总蛋白的39%,单纯蛋白纯化后纯度达95%,用抗人TRAIL多抗可以确认表达了TRAIL分子,能诱导几株肿瘤细胞凋亡.原核表达系统正确表达了TRAIL分子,并摸索了中试生产的条件,为其在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李燕	中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所	60	332	11.0	16.0
2	徐维明	中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所	7	39	4.0	6.0
3	杨芳	中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所	5	7	1.0	2.0
4	刘红岩	中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所	17	175	8.0	13.0
5	龙海亭	中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所	4	3	1.0	1.0
6	肖红剑	中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所	2	2	1.0	1.0