家蚕微孢子RAD51基因的克隆、原核表达与体外翻译

• 作者: 常智杰 高永珍 黄可威
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蚕微孢子 RAD51基因 序列
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 56-63
• 页数: 8页
• 分类号: S884.2|Q786
• 字数: 4536字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0257-4799.2003.01.012

摘要

从家蚕微孢子(Nosema bombycis)中通过RT-PCR扩增出RAD51(DNA repair protein)基因的3′端部分序列,经5′-RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)后得到全长cDNA序列,共1 002 bp,编码334个氨基酸.虽然用Northern Blot检测不出mRNA的特异性表达带,但用RT-PCR直接扩增出全长cDNA而证实了该基因.该cDNA已作为新基因提交到GenBank数据库中,登录号为AF037305.将该基因在大肠杆菌(E.coli)中进行表达,得到表达量较高的分子量约37 ku的蛋白质,经亲和层析纯化后得到较浓的单一蛋白带,纯化效果较好.用兔网织红细胞裂解液在体外也翻译出该分子量为37 ku的蛋白质,进一步确证了该蛋白.通过BLAST查询GenBank数据库,发现它与许多生物体的RAD51同源性很高.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄可威	中国农业科学院蚕业研究所	28	218	9.0	13.0
2	常智杰	清华大学生命科学与技术系	38	173	8.0	11.0
3	高永珍	中国农业科学院蚕业研究所	6	86	3.0	6.0