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摘要:
为进一步研究利用EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)进行免疫治疗的可行性,构建了含有去除致癌基因的EB病毒LMP1片段(LMP1△)的穿梭质粒pAdTrack-CMV-LMP1△,将它与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1用电转染的方法共同导入大肠杆菌BJ5183中,在宿主菌重组酶的介导下进行同源重组.通过抗性筛选,获得含有重组腺病毒基因的质粒;然后再通过脂质体将重组腺病毒质粒导入腺病毒包装细胞HEK293细胞中,在HEK293细胞E1蛋白的反式作用下,病毒被包装.将包装病毒的细胞裂解上清进行PCR鉴定证实,病毒DNA中含有目的基因的特异性片段.RT-PCR证明了外源基因在真核细胞中得以转录,免疫酶和Western blot的结果也显示,LMP1△蛋白在真核细胞得到表达.将扩增后的病毒感染HeLa细胞,测定病毒滴度为3.0×109PFU/ml.为初步探讨其免疫效果,采用肌肉注射和滴鼻的方式感染Balb/c纯系小鼠,免疫酶检测其特异性抗体,LDH法检测特异性CTL的杀伤作用,结果发现,两种免疫途径均可诱发小鼠针对LMP1的特异性体液免疫和细胞免疫,而且Ad5作为免疫对照组的小鼠则没有引起相应的免疫反应.
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文献信息
篇名 去除致癌基因的EB病毒潜伏膜蛋白1的重组腺病毒的构建及其免疫效果
来源期刊 病毒学报 学科 医学
关键词 EB病毒 重组腺病毒 EB病毒潜伏膜蛋白1△ 特异性细胞毒作用
年,卷(期) 2003,(3) 所属期刊栏目 人与动物病毒
研究方向 页码范围 245-248
页数 4页 分类号 R373.9|Q78
字数 3319字 语种 中文
DOI 10.3321/j.issn:1000-8721.2003.03.011
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 周玲 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 40 192 8.0 12.0
2 曾毅 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 104 686 13.0 23.0
3 贾俊岭 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 1 2 1.0 1.0
4 左建民 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 7 32 4.0 5.0
5 王琦 中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所 8 228 4.0 8.0
传播情况
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2014(1)
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研究主题发展历程
节点文献
EB病毒
重组腺病毒
EB病毒潜伏膜蛋白1△
特异性细胞毒作用
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
病毒学报
双月刊
1000-8721
11-1865/R
大16开
北京西城区迎新街100号
82-227
1985
chi
出版文献量(篇)
2313
总下载数(次)
18
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:the National Natural Science Foundation of China
官方网址:http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:数理科学
国家重点基础研究发展计划(973计划)
英文译名:National Basic Research Program of China
官方网址:http://www.973.gov.cn/
项目类型:
学科类型:农业
国家高技术研究发展计划(863计划)
英文译名:The National High Technology Research and Development Program of China
官方网址:http://www.863.org.cn
项目类型:重点项目
学科类型:信息技术
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