人纤溶酶原Kringle1-5结构域的表达及活性鉴定

• 作者: 叶勤 周庆玮 李载平 甘人宝 谢静莉 辛利
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: K1-5 毕赤酵母 表达 纯化 生物活性
• 年，卷（期）: 2003,（8）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 761-767
• 页数: 7页
• 分类号: Q5
• 语种: 英文

摘要

利用RT-PCR的方法从人肝癌细胞株HepG2细胞内获得了编码人纤溶酶原(hPlasminogen) 的Kringle 1到5 (简称K1-5)的cDNA, 将其克隆到表达载体pHIL-S1中. 将重组载体pHIL-K1-5转化毕赤酵母GS115, 得到的重组菌株用甲醇进行诱导表达, 并利用赖氨酸亲和柱纯化重组蛋白质. 重组蛋白质K1-5能特异性地按剂量依赖的方式抑制碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)刺激的牛主动脉内皮细胞(BAEC)的增殖, 浓度为14 mg/L时达到最大抑制效果的50%; K1-5能抑制bFGF引起的BAEC的迁移, 50 mg/L的K1-5对BAEC迁移的抑制率为47%; K1-5还能影响BAEC细胞的周期, 14 mg/L的K1-5使细胞在G0～G1期积聚.