杆状病毒囊膜糖蛋白gp64基因启动子活性分析

• 作者: 何家禄 吴祥甫 周亚竟 张元兴 张志芳 易咏竹
• 来源期刊: 生物化学与生物物理学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 杆状病毒 gp64基因启动子 同源重复序列3 病毒因子 转染
• 年，卷（期）: 2003,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 18-26
• 页数: 9页
• 分类号: Q93
• 语种: 英文

摘要

GP64是杆状病毒在其发育循环第一时相所产生的芽生型病毒粒子(budded virus, BV)的特异性囊膜糖蛋白, 它在病毒入侵细胞过程中具有重要作用. 为了探明杆状病毒gp64基因的表达调控, 从所克隆的BmNPV和AcMNPV gp64基因ATG上游437～439 bp启动子的序列分析发现, 该启动子同时具有早期和晚期转录模体. 将所构建的该启动子控制下荧光素酶报告基因(Luc)的非融合表达质粒分别转染Bm-N和Sf-21细胞进行瞬间表达分析, BmNPV gp64启动子能被允许宿主Bm-N细胞RNA聚合酶II所识别, AcMNPV gp64启动子既能被允许宿主Sf-21又能被非允许宿主Bm-N细胞RNA聚合酶II所识别, 同时, 这两个启动子的转录活性在各自的允许宿主细胞中被相应的病毒因子所反式激活2.4～4倍. 将家蚕核多角体病毒同源重复序列3(BmNPV homologous region-3, hr3)克隆到该启动子控制下的Luc报告基因下游, 用所构建的质粒分别转染细胞, 瞬间表达分析结果表明, BmNPV hr3能分别增强该启动子在Bm-N和Sf-21细胞中的转录活性13～22倍和7000～14 000倍以上. 同时, 相应的病毒因子能反式激活插入了hr3的gp64启动子在各自允许宿主细胞中转录活性73～78倍, 这暗示着BmNPV hr3除了具有病毒DNA复制原点和增强子的功能外, 它在病毒的反式激活过程中起着重要的作用.