对鳞翅目害虫有活性的cry1C基因的克隆和表达

• 作者: 宋福平 张杰 韩岚岚 高继国 黄大昉
• 来源期刊: 植物保护学报
• 学科: 生物学
• 关键词: PCR-RFLP cry1Cb基因 苏云金芽孢杆菌 小菜蛾
• 年，卷（期）: 2003,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 161-165
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 2481字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7518.2003.02.010

摘要

在鉴定苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis, 简称Bt)Btc001菌株cry基因型的基础上,构建了Btc001菌株质粒DNA Hind III片段的文库,并利用聚合酶链式反应-限制性酶切片段多态性(PCR-RFLP)方法筛选出含有cry1Cb全长基因的13.5kb大片段,酶切分析得到该片段的物理图谱,BamHI和EcoRI酶切完成了6.5kb含全长基因的亚克隆,并对这条6.5kb片段亚克隆、测序,序列在国际核酸序列数据库(GenBank)登记(AY007686),并由Bt杀虫晶体蛋白基因国际命名委员会命名为cry1Cb2基因.根据序列设计了一对用于扩增全长基因的引物S5B1CB和S3B1CB,扩增产物插入表达载体pET-21b中,诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达.表达产物对小菜蛾(Plutella xylostella)表现出较高活性,LC50达到7.97μg/ml.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张杰	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	165	1879	22.0	38.0
2	高继国	东北农业大学生命科学院	81	539	12.0	19.0
3	黄大昉	中国农业科学院生物技术研究所	96	1673	22.0	38.0
4	宋福平	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	51	535	14.0	20.0
5	韩岚岚	中国农业科学院植物保护研究所植物病虫害生物学国家重点实验室	4	47	4.0	4.0